普通生物顯微鏡的放大倍數可達幾百倍。一般真菌和酵母菌等微生物個體較大，用低倍物鏡和高倍物鏡即可得到良好的效果。但要看到經染色的細菌的形態和真核生物細胞的形態構造，最好使用油鏡頭。

油鏡比干燥系高倍物鏡的工作距離短得多，最短的只有0.1mm，且調焦程序又不同于干燥系物鏡，操作時須特別細心，防止油鏡壓碎標本或損壞油鏡。

先在干燥系高倍物鏡下找準被檢物，并置于視野中央，然后升高鏡筒約1.5cm，再把油鏡頭旋轉至對準正下方。在玻片標本的鏡檢部位滴一滴浸液（鏡頭油），將頭偏于一側觀察，下降鏡筒，到物鏡的前透鏡與浸液接觸時停止。繼而從目鏡里細心觀察視野，旋轉粗準焦螺旋，使鏡筒緩慢地上升，剛出現不太清晰的物像時就 換用細準焦螺旋，至物像清晰后進行觀察。

初次使用油鏡，也可按照干燥系物鏡的調焦程序調節焦距。即先下降鏡筒至物鏡最接近蓋玻片，但絕不能壓在標本上，再上升物鏡調焦。但此法有將浸液擠出去和造成空泡的缺點。若上調粗準焦螺旋時，鏡筒已升到油浸鏡頭離開油滴，仍不能發現被檢目的物，須重新調節。

油鏡使用的鏡頭油為香柏油或石蠟油。因香柏油黏稠度較高，使用之后擦拭較麻煩，因而許多人采用石蠟油代替使用。滴浸液時，要盡量避免氣泡的形成，如果形成了氣泡，可用解剖針尖將氣泡排在一邊，以免影響觀察。

油鏡使用完畢，提升鏡筒約2cm，把油鏡轉離光軸，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的大部分油，再用蘸少量二甲苯的擦鏡紙擦去鏡頭上的殘余油跡，最后用干擦鏡紙擦去鏡頭上的二甲苯。擦拭時要順鏡頭的直徑方向，不要沿鏡頭的圓周方向擦。玻片標本上的油也要進行清潔，即把一小張擦鏡紙蓋在載玻片油滴上，在紙上滴一些二甲苯，趁濕把紙往外拉，這樣連續作三四次即可干凈（如果是使用石蠟油，清潔時只用擦鏡紙不必滴二甲苯）。

油鏡的使用原理：

油鏡的透鏡很小，光線通過玻片與油鏡頭之間的空氣時，因介質密度不同，發生折射或全反射，使射入透鏡的光線減少，物像顯現不清。若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515），則使進入透鏡的光線增多，視野亮度增強，使物像明亮清晰。

由于細菌體積微小，故在細菌的形態學研究中，經常需要借助顯微鏡油鏡，才能比較清楚地進行觀察。因此，必須熟練地掌握油鏡的使用及保護法。

（一）油鏡頭的識別：

各接物鏡的放大率可由其外形辨認，鏡頭長度越大，鏡片直徑越小，放大倍數大；反之，放大倍數小。油鏡頭長度大于低、高倍鏡，鏡頭下緣一般刻有一圈黑線或白線，并刻有100X、1.25或oil等字樣。

（二）油鏡的使用法：

1、準備：

使用顯微鏡油鏡時，必須將顯微鏡端正直立桌上，不得將鏡臂彎曲，使載物臺傾斜，以免香柏油流溢，影響觀察，污染臺面。

2、對光：

采用天然光為光源時，宜用平面反光鏡；若用人工燈光時，則用凹面鏡。

首先打開光圈，轉動反光鏡，使光線集中于集光器。可根據需要，上下移動集光器和縮放光圈，以獲得最佳光度。

一般用低倍鏡或高倍鏡觀察物像或用油鏡檢查不染色標本時，需下降集光器并適當地縮小光圈，使光度減弱；若用油鏡檢查染色標本時，光度宜強。應將顯微鏡亮度開關調至最亮，光圈完全打開，集光器上升至與載物臺相平。

3、調焦距：

A、將標本片放載物臺上，用標本推進器固定，將欲檢部分移至接物鏡下。先用低倍鏡找出標本的位置，然后提高鏡筒，在標本的待檢部位滴鏡油一滴，再換油鏡觀察。

B、轉動粗調節器使載物臺徐徐上升（或使鏡筒漸漸下降），直至油鏡頭浸沒至油中。此時眼睛應從側面觀察，以免壓碎標本片和損壞鏡頭。

C、然后雙眼移至接目鏡，一面從接目鏡觀察，一面反方向緩慢地轉動粗調節器（下降載物臺，或上升鏡筒），當出現模糊物像時，換用細調節器，轉動至物像清晰為止。

D、觀察完畢，應先提高鏡筒，并將油鏡頭扭向一側，再取下標本片。油鏡頭使用后，應立即用擦鏡紙擦凈鏡頭上的油。若鏡油粘稠干結于鏡頭上，可用擦鏡紙蘸 少許二甲苯擦拭鏡頭，并隨即用干的鏡紙

擦去殘存的二甲苯，以免二甲苯滲入，溶解用以粘固透鏡的膠質物，造成鏡片移位或脫落。