帶校正環(huán)物鏡(Correction collar objective)在物鏡的中部裝有環(huán)裝的調(diào)節(jié)環(huán),當(dāng)轉(zhuǎn)動調(diào)節(jié)環(huán)時,可調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)透鏡組之間的距離,從而校正由蓋玻片厚度不標(biāo)準(zhǔn)引起的覆蓋差。調(diào)節(jié)環(huán)上的刻度可從0.11-0.23,在物鏡的外殼上也標(biāo)科有此數(shù)字,表明可校正蓋玻片從0.11-0.23mm 厚度之間的誤差。
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Q:為什么有些物鏡是油鏡和水鏡?A:物鏡的分辨率很大程度上取決于物鏡的NA值,NA值又受透鏡與標(biāo)本之間介質(zhì)的折射率的影響。高折射率的介質(zhì)可以聚集更多的光使圖像更亮、更清晰。當(dāng)使用空氣作為透鏡和標(biāo)本之間的介質(zhì)時,一般低NA值的物鏡就可滿足要求。但是,高NA值的物鏡需要高折射率的介質(zhì),那么油可以達到高折射率。當(dāng)NA 值超過1.0時,在聚光鏡的頂部透鏡載玻片的底部點油可以達到更好的效果。浸油物鏡通常會標(biāo)記“oil”或“oel”。一些物鏡會應(yīng)用于活體標(biāo)本的觀察,就需要水作為介質(zhì)。這些物鏡通常會標(biāo)記“WI”。
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1、實驗時要把便攜式金相顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置,鏡座應(yīng)距桌沿6~7cm左右。2、打開光源開關(guān),調(diào)節(jié)燈光到合適大小。3、首先使鏡頭正對載物臺上的通光孔。先把鏡頭調(diào)節(jié)至距載物臺1~2cm左右處,然后用左眼注視目鏡內(nèi),接著調(diào)節(jié)燈光的亮度,使光線通過聚光器入射到鏡筒內(nèi),這時視野內(nèi)呈明亮的狀態(tài)。4、將所要觀察的標(biāo)本放在載物臺上,使標(biāo)本被觀察的部分位于通光孔的正中央。5、觀察之前,先轉(zhuǎn)動調(diào)焦手輪,使物鏡逐漸接近式樣標(biāo)本。然后,左眼注視目鏡內(nèi),同時右眼不要閉合(要養(yǎng)成睜開雙眼用顯微鏡進行觀察的習(xí)慣,以便在觀察的同時能用右眼看著繪圖)。6、如果在視野內(nèi)看到的物像不符合實驗要求,可慢慢調(diào)節(jié)調(diào)焦手輪,直至物像清晰為止。7、拆目鏡及物鏡時,要先拆物鏡,再拆目鏡。裝目鏡及物鏡時恰好相反,要先裝目鏡,再裝物鏡。如此可避免灰塵落入顯微鏡中。
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1952年,Nomarski在相差顯微鏡原理的基礎(chǔ)上發(fā)明了微分干涉顯微鏡。DIC顯微鏡又稱Nomarski相差顯微鏡(Nomarki contrast microscope),其優(yōu)點是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。與相差顯微鏡相比,其標(biāo)本可略厚一點,折射率差別更大,故影像的立體感更強。 微分干涉顯微鏡(DIC顯微鏡 differential interference contrast microscope)的物理原理完全不同于相差顯微鏡,技術(shù)設(shè)計要復(fù)雜得多。DIC利用的是偏振光,透射式DIC顯微鏡有四個特殊的光學(xué)組件:偏振器(polarizer)、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器(analyzer)。偏振器直接裝在聚光系統(tǒng)的前面,使光線發(fā)生線性偏振。在聚光器中則安裝了石英Nomarski棱鏡,即DIC棱鏡,此棱鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光(x和y),二者成一小夾角。聚光器將兩束光調(diào)整成與顯微鏡光軸平行的方向。最初兩束光相位一致,在穿過標(biāo)本相鄰的區(qū)域后,由于標(biāo)本的厚度和折射率不同,引起了兩束光發(fā)生了光程差。在物鏡的后焦面處安裝了第二個Nomarski棱鏡,即DIC滑行器,它把兩束光波合并成一束。這時兩束光的偏振面(x和y)仍然存在。最后光束穿過第二個偏振裝置,即檢偏器。在光束形成目鏡DIC影像之前,檢偏器與偏光器的方向成直角。檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有相同偏...
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半復(fù)消色差物鏡(Semi apochromatic objective) 半復(fù)消色差物鏡又稱氟石物鏡,物鏡的外殼上標(biāo)有“FL”字樣。在結(jié)構(gòu)上透鏡的數(shù)目比消色差物鏡多,比復(fù)消色差物鏡少;成像質(zhì)量上,遠較消色差物鏡為好,接近于復(fù)消色差物鏡。平場物鏡是在物鏡的透鏡系統(tǒng)中增加一快半月形的厚透鏡,以達到校正場曲的缺陷。平場物鏡的視場平坦,更適用于鏡檢和顯微照相。2004年蔡司推出了ICCS物鏡是在傳統(tǒng)的平場半復(fù)消色差物鏡的基礎(chǔ)上進一步校正倍率色差和無應(yīng)變,增強短波長的透過率,并且增強反差,明顯提高分辨率。
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一、數(shù)值孔徑(NA)子午光線能進入或離開纖芯(光學(xué)系統(tǒng)或掛光學(xué)器件)的最大圓錐的半頂角之正弦,乘以圓錐頂所在介質(zhì)的折射率,數(shù)值孔徑是判斷物鏡性能(分辨率、焦深、亮度等)的重要指數(shù)。數(shù)值孔徑又叫鏡口率,簡寫為NA。它是由物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率(n)與物鏡孔徑角的一半(θ\2)的正弦值的乘積,其大小由下式?jīng)Q定:NA=n×sinθ/2。數(shù)值孔徑簡寫NA(蔡司顯微鏡的數(shù)值孔徑簡寫CF),數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低(即消位置色差的能力,蔡司公司的數(shù)值孔代表消位置色差和倍率色差的能力)的重要標(biāo)志。其數(shù)值大小分別標(biāo)在物鏡和聚光鏡的外殼上??讖浇怯址Q“鏡口角”,是物鏡光軸上的物體點與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度??讖浇窃酱?,進入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,與焦點的距離成反比。顯微鏡觀察時,若想增大NA值,孔徑角是無法增大的,唯一的辦法是增大介質(zhì)率n值?;谶@一原理,就產(chǎn)生了水浸系物鏡和油浸物鏡,因介質(zhì)的折射率n值大于1,NA值就能大于1。數(shù)值孔徑最大值為1.4,這個數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達到了極限。目前,有用折射率高的溴萘作介質(zhì),溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。與其他參數(shù)的關(guān)系:數(shù)值孔徑是顯微鏡物鏡的重要參數(shù),決定了物鏡的分辨率。與物鏡的放大倍數(shù),工作距離,景深有直接關(guān)系。一般來說,它與分辨率成正比,...
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