暗視野觀察\暗場（Dark field）暗視野觀察也叫暗場，暗視野實際是暗場照明。它的特點和明視野不同，不直接觀察到照明的光線，而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此，視場成為黑暗的背景，而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的像。暗視野的原理是根據(jù)光學上的丁道爾現(xiàn)象，微塵在強光直射通過的情況下，人眼不能觀察，這是因為強光繞射造成的。若把光線斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了體積，為人眼可見。暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點是不讓光束由下至上的通過被檢物體，而是將光線改變途徑，使其斜射向被檢物體，使照明光線不直接進入物鏡，利用被檢物體表面反射或衍射的光形成明亮圖像。暗視野觀察的分辨率遠高于明視野觀察，最高達0.02—0.004mm。
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復消色差物鏡（Apochromatic objective）這類物鏡的結(jié)構(gòu)復雜，透鏡采用了特種玻璃或螢石等材料制作而成，物鏡的外殼上標有'Apo'字樣。它對兩個色光實現(xiàn)了正弦條件，要求嚴格地校正軸上點的位置色差（紅、藍二色）、球差（紅、藍二色）和正弦差，同時要求校正二級光譜（再校正綠光的位置色差）。其倍率色差并不能完全校正，一般須用目鏡補償。
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1、校正目鏡分劃板十字線將目鏡上的卡榫插入鏡筒上適當?shù)目冢鼓跨R分劃板十字線處于東西（橫絲）、南北（豎絲）方向。 2、偏光鏡的校正 （1）確定下偏光鏡（起偏振鏡）的振動方向?qū)⑸掀忡R（檢偏振鏡）自鏡中推出，只用下偏光鏡觀察工作臺上。轉(zhuǎn)動工作臺，當黑云母解理縫與下偏光鏡的振動方向平行時，對黑云母吸收性最強，此時呈現(xiàn)深棕色；當解理縫與起偏鏡的振動方向垂直時，黑云母吸收性微弱，此時晶體呈現(xiàn)淡黃色，據(jù)此就能確定起偏振鏡的振動方向。 （2）調(diào)整下偏光鏡的振動方向與目鏡分劃板十字線橫絲平行將黑云母解理縫與目鏡分劃板十字線橫絲平行，轉(zhuǎn)動下偏光鏡至黑云母呈現(xiàn)深棕色位置，此時下偏光鏡的振動方向平行橫絲，其刻線應(yīng)對準0°或180°。 （3）確定上偏光鏡（檢偏振鏡）與下偏光鏡（起偏光鏡）的振動方向正交將黑云母切片取出，推入上偏光鏡，如果視域呈黑暗，則上、下偏光鏡振動方向正交；否則轉(zhuǎn)動上偏光鏡直至視域最黑暗。 3、物鏡中心調(diào)節(jié)方法（1）觀察旋轉(zhuǎn)工作臺上的切片，在切片中找一小黑點，使之位于目鏡十字線中心。 （2）轉(zhuǎn)動工作臺，若物鏡光軸中心0與工作臺中心不一致，黑點即離開十字線中心繞一個圓轉(zhuǎn)動。圓的中心S即為工作臺的中心。 （3）將小黑點轉(zhuǎn)至距十字線中心最遠的一點處，旋轉(zhuǎn)物鏡座上兩個調(diào)節(jié)螺絲使小黑點自1處移至0-1直線...
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偏光顯微鏡在光學顯微鏡的光學系統(tǒng)中插入了起偏振鏡和檢偏振器，用以檢查樣品的各向異性和雙折射性的顯微鏡。起偏振鏡和檢偏振鏡都是由偏光棱鏡或偏光板的尼科耳(nicol)棱鏡制成。前者安裝在光源與樣品之間，后者安裝在接物鏡與接目鏡之間或接目鏡之上。在生物樣品中，肌肉纖維、骨骼和牙齒等具有各向異性，淀粉粒、染色體和紡錘體等具有雙折射性，因此被用于組織細胞的化學研究。光源最好用單波長光線。由于生物樣品比金相、巖石或結(jié)晶的雙折射性顯著微弱，所以有時也借敏感的檢偏振板造成的相加相減現(xiàn)象而利用其干涉色。偏振光的基礎(chǔ)知識 一、自然光和偏振光 光是一種電磁波，屬于橫波(振動方向與傳播方向垂直)。一切實際的光源，如日光、燭光、日光燈及鎢絲燈發(fā)出的光都叫自然光。這些光都是大量原子、分子發(fā)光的總和。雖然某一個原子或分子在某一瞬間發(fā)出的電磁波振動方向一致，但各個原子和分子發(fā)出的振動方向也不同，這種變化頻率極快，因此，自然光是各個原子或分子發(fā)光的總和，可認為其電磁波的振動在各個方向上的幾率相等。 自然光在窗過某些物質(zhì)，經(jīng)過反射、折射、吸收后，電磁波的振動波以被限制在一個方向上，其他方向振動的電磁波被大大削弱或消除。這種在某個確定方向上振動的光稱為偏振光。偏振光的振動方向與光波傳播方向所構(gòu)成的平面稱為振動面。 二、直線偏振光、圓偏振光及橢圓偏振光 1.直線偏振光 直線偏振光由于光線的振動方向都在同一個...
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景深在照相時是指成像畫面內(nèi)近處物體與遠處物體之間的距離，如果在一張照片內(nèi)近處的景物與遠處的景物都很清晰說明景深大。照相機的景深可以根據(jù)照片需要展現(xiàn)的效果做適當調(diào)整。顯微鏡一般都是垂直向下取景的，通過視場直徑內(nèi)觀察到的物體表面凸起的位置與凹下的位置都能夠看的很清楚時，那么凸點與凹點之間的高度差就是景深了，對于顯微鏡來說景深越大越好，景深越大在觀察高低不平整的物體表面時，能夠得到更好更立體的清晰度畫面。顯微鏡的景深計算方法景深表示,象平面上清晰的象所對應(yīng)物平面的前后空間的深度：dtot=(λ*n)/NA + n/(M?NA) * e例：40.5um =（0.55um * 1）/0.1 + 1/(4*0.1)*14um (這里取中間值14um)注：這里以4x物鏡為例公式中：dtot：景深NA ：數(shù)值孔徑M ：總放大率λ： 光波波長, （通常λ=0.55um）n : 試樣與物鏡之間介質(zhì)的折射率（空氣: n=1、油: n=1.515）e : 可分辨的最小距離，檢測器被放置在顯微鏡物鏡的像面，其橫向放大率是 M（e一般是4um、5um、6um......24um） 顯微鏡的景深計算方法物鏡4X10X40X100X數(shù)值孔徑0.10.250.651.25數(shù)值孔徑（N.A.）計算公式數(shù)值孔徑是判斷物鏡性能（分辨...
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1、使用方法 （1）裝好顯微鏡后，在確保供電電壓與顯微鏡的額定電壓一致后方可插上電源插頭，打開電源開關(guān)，并選擇照明方式。 （2）根據(jù)所觀察的標本，選好臺板（觀察透明標本時，選用毛玻璃臺板；觀察不透明標本，選用黑白臺板），裝入底座臺板孔內(nèi)，并鎖緊。 （3）松開調(diào)焦滑座上的緊固螺釘，調(diào)節(jié)鏡體的高度，目測工作距離在100mm左右，（使其與所選用的物鏡放大倍數(shù)大體一致的工作距離）調(diào)好后，鎖緊托架，將安全環(huán)緊靠調(diào)焦托架并鎖緊。 （4）裝好目鏡，先將目鏡筒上的螺釘松開，裝好目鏡后再將此螺釘擰緊（目鏡放進目鏡筒時，要特別小心，不要手觸摸鏡頭透鏡表面）。 （5）調(diào)好瞳距，當使用者通過兩個目鏡觀察視場時中不是一個圓形視場時，應(yīng)扳動兩棱鏡箱，改變目鏡筒的出瞳距離，使之達到能觀察到一個完全重合的圓形視場（說明瞳距已調(diào)好）。 （6）觀察標本（對標本調(diào)焦）。先將左目鏡筒上的視度圈調(diào)至0刻線位置。通常情況下，先從右目鏡筒（即固定目鏡筒）中觀察，將變倍筒（有變倍裝置機型時）轉(zhuǎn)至最高倍位置，轉(zhuǎn)動調(diào)焦手輪對標本調(diào)焦，直至標本的像清晰后，再把變倍筒轉(zhuǎn)至最低倍位置，此時，用左目鏡筒觀察，如不清晰則沿軸向調(diào)節(jié)目鏡筒上的視度圈，直到標本的像清晰，然后再雙目觀察其調(diào)焦效果。 （7）結(jié)束觀察時，關(guān)掉電源，移走標本，用防塵罩將顯微鏡嚴密罩蓋。 2、顯...
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